पीसीआर प्रयोगों में आमतौर पर कई एंजाइमों का उपयोग किया जाता है

पोलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया, संक्षिप्त रूप मेंपीसीआरअंग्रेजी में, एक आणविक जीव विज्ञान तकनीक है जिसका उपयोग विशिष्ट डीएनए अंशों को बढ़ाने के लिए किया जाता है।इसे शरीर के बाहर एक विशेष डीएनए प्रतिकृति के रूप में माना जा सकता है, जो बहुत कम मात्रा में डीएनए को बढ़ा सकता है।पूरे दौरानपीसीआरप्रतिक्रिया प्रक्रिया में, पदार्थों का एक वर्ग महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है - एंजाइम।

1. टाक डीएनए

के शुरुआती दिनों में प्रयोगों मेंपीसीआर, वैज्ञानिकों ने एस्चेरिचिया कोली डीएनए पोलीमरेज़ I का उपयोग किया, लेकिन इस एंजाइम के साथ एक समस्या है: इसे हर बार एक चक्र के दौरान नए एंजाइम को फिर से भरने की आवश्यकता होती है, जिससे ऑपरेशन के चरण थोड़े जटिल हो जाते हैं और इसे पूरी तरह से स्वचालित रूप से बढ़ाना मुश्किल हो जाता है।1988 में वैज्ञानिकों द्वारा थर्मस एक्वाटिकस से गलती से टाक डीएनए पोलीमरेज़ को अलग करने के बाद यह समस्या हल हो गई थी। तब से, डीएनए का स्वचालित प्रवर्धन एक वास्तविकता बन गया है।इस एंजाइम की खोज भी होती हैपीसीआरप्रौद्योगिकी एक सुविधाजनक, व्यावहारिक और सार्वभौमिक तकनीक है।वर्तमान में, टाक डीएनए पोलीमरेज़ डीएनए किट में सबसे आम पोलीमरेज़ है।

2. पीएफयूडीएनए

जैसा कि ऊपर उल्लेख किया गया है, Taq DNase में एक बड़ा बग है, इसलिए बेमेल के कारण गैर-विशिष्ट प्रवर्धन से बचने के लिए वैज्ञानिकों ने Taq DNA पोलीमरेज़ को कुछ हद तक संशोधित किया है, जिसके परिणामस्वरूप गलत परीक्षण परिणाम आते हैं।लेकिन टाक डीएनए पोलीमरेज़ का संशोधन कमरे के तापमान पर डीएनए पोलीमरेज़ की गतिविधि को रोक सकता है।PfuDNA पोलीमरेज़, Taq DNA पोलीमरेज़ के उपरोक्त नुकसानों को अच्छी तरह से पूरा कर सकता है, ताकि पीसीआर प्रतिक्रिया सामान्य रूप से की जा सके, और लक्ष्य जीन प्रवर्धन की सफलता दर में प्रभावी ढंग से सुधार किया जा सके।

3. रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस

रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस की खोज 1970 में की गई थी। यह एंजाइम आरएनए को टेम्पलेट के रूप में, डीएनटीपी को सब्सट्रेट के रूप में उपयोग करता है, बेस पेयरिंग के सिद्धांत का पालन करता है, और 5′-3′ दिशा में आरएनए टेम्पलेट के पूरक डीएनए सिंगल स्ट्रैंड को संश्लेषित करता है।रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस मुख्य रूप से डीएनए या आरएनए टेम्पलेट्स से डीएनए पोलीमरेज़ गतिविधि पर निर्भर है और इसलिए इसमें 3′-5′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि नहीं है।हालाँकि, इसमें RNase H गतिविधि है, जो रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस की संश्लेषण लंबाई को एक निश्चित सीमा तक सीमित करती है।वाइल्ड रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस की कम निष्ठा और थर्मोस्टेबिलिटी के कारण वैज्ञानिकों ने इसे संशोधित भी किया।

के लिएपीसीआरप्रयोगों में, मुख्य उपभोग्य वस्तुएं हैं: व्यक्तिगत पीसीआर ट्यूब, 4/8-स्ट्रिप पीसीआर ट्यूब, पीसीआर प्लेटें।

लेबियो कापीसीआर उपभोग्य वस्तुएंनिम्नलिखित हैफायदे:

पीसीआर प्लेटें: व्यापक थर्मल साइक्लर अनुकूलता;उच्च-विपरीत, आसान अच्छी पहचान;अच्छा प्रतिदीप्ति प्रतिबिंब; अच्छागर्मी का हस्तांतरण;प्रमाणित DNase, RNase, DNA, पीसीआर अवरोधक, और परीक्षण किया गया पाइरोजेन-मुक्त।

व्यक्तिगत पीसीआर ट्यूब: वाष्पीकरण प्रतिरोधी; अच्छागर्मी का हस्तांतरण;उत्कृष्ट ऑप्टिकल स्पष्टता; प्रमाणित DNase, RNase, DNA, पीसीआर अवरोधक, और परीक्षण किया गया पाइरोजेन-मुक्त।

4/8-स्ट्रिप्स पीसीआर ट्यूब: अति पतली दीवारें; उच्च स्पष्टता; अच्छा प्रतिदीप्ति प्रतिबिंब;फार्मास्युटिकल उद्योग, खाद्य उद्योग और आणविक जीव विज्ञान में उपयोग कर सकते हैं; उच्च गुणवत्ता, कुंवारी पीपी सामग्री; प्रमाणित DNase, RNase, DNA, पीसीआर अवरोधक, और परीक्षण किए गए पाइरोजेन-मुक्त।